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γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶（GCL） 品牌：原鑫生物 類(lèi)別：代測服務(wù) - LC-MS檢測|液相串聯(lián)質(zhì)譜 規格：暫無(wú)   預約待測

    γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶（GCL）

    測定意義：

    GCL是GSH合成的限速酶，GSH對GCL有反應抑止作用。GCL基因表達受多種要素調理，如氧化劑、抗氧化劑、生長(cháng)因子和炎癥因子等。GCL活性上下對GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。

    測定原理：

    在A(yíng)TP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無(wú)機磷分子，經(jīng)過(guò)測定無(wú)機磷增加速率，即可計算出GCL活性。

    GCL測定操作

    1.分光光度計預熱30min，調理波長(cháng)到660nm，蒸餾水調零。

    2.2.空白管：取1.5mLEp管，依次參加試劑一240μL、試劑二260μL、試劑三60μL和蒸餾水120μL，混勻后蓋緊，37℃水浴精確反響15min；再參加試劑四300μL，混勻后，25℃、8000g，離心10min，取上清500μL，參加試劑五500μL，混勻后蓋緊，45℃水浴10min，冷卻后測定660nm處吸光值，記為A空白管。

    3.3.測定管：取1.5mLEp管，依次參加試劑一240μL、試劑二260μL、試劑三60μL和上清液120μL，混勻后蓋緊，37℃水浴精確反響15min；再參加試劑四300μL，混勻后，25℃、8000g，離心10min，取上清500μL，參加試劑五500μL，混勻后蓋緊，45℃水浴10min，冷卻后測定660nm處吸光值，記為A測定管。