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脂肪酸類(lèi) - 甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)

脂肪酸類(lèi) - 甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)

Triglyceride (TG) Content Assay kit

一、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品描述 

甘油三酯(TG)是由長(cháng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細胞膜的主要成分,也是重要的 呼吸底物和供能物質(zhì),在脂肪酸運輸過(guò)程中具有重要作用。血清中內源性三酰甘油主要以 VLDL 的 形式運輸,外源性三酰甘油主要以 CM 的形式運輸,甘油三酯含量的增高與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾 病密切相關(guān)。 甘油三酯經(jīng) KOH 皂化水解生成甘油及脂肪酸,過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛,在銨離子存在下甲醛 能夠與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),產(chǎn)物在 420 nm 處具有特征吸收峰,通過(guò)吸光值的變化即可定量 檢測甘油三酯的含量。


二、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品內容

甘油三酯含量檢測試劑盒說(shuō)明圖1


三、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明 

        測定過(guò)程中所需要的儀器和試劑:可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿 器、可調式移液器、臺式離心機、恒溫水浴、正庚烷、異丙醇和蒸餾水。

  1. 甘油三酯(TG)的提?。筛鶕A實(shí)驗結果適當調整樣本量及比例)

    ①細菌或細胞:離心收集細菌或細胞至離心管內,按照細菌或細胞數量(104 個(gè)):試劑一體積(mL) 為(500-1000):1 的比例(建議 500 萬(wàn)細菌或細胞加入 1 mL 試劑一)處理樣品,冰浴超聲破碎(功 率 20%或 200 W,超聲 2 s,間隔 1 s,總時(shí)間 1 min),4℃ 8000 g 離心 10 min,取上清待測。

    ②組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:(5-10)的比例(建議稱(chēng)取 0.1 g 組織,加 入 1 mL 試劑一)處理樣品,冰浴勻漿,4℃ 8000 g 離心 10 min,取上清待測。

    ③血清(漿)、培養液等液體樣本:直接測定或適當稀釋后再進(jìn)行測定。

  2. 測定步驟

    ①分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上,調節波長(cháng)至 420 nm,蒸餾水調零。

    ②在離心管中依次加入下列試劑:

  甘油三酯含量檢測試劑盒說(shuō)明圖2

注:加入試劑二后需劇烈震蕩,振蕩幅度、時(shí)間、反復次數以及等待分層時(shí)間均應保持一致;

吸光值測定:取 200 μL 反應液至微量玻璃比色皿或 96 孔板中,測定 420 nm 處吸光值,記為 A 測定,A 標準和 A 空白;計算?A 測定=A 測定-A 空白,?A 標準=A 標準-A 空白。注:空白管只需測 定 1-2 次。

3.甘油三酯(TG)含量計算

甘油三酯含量檢測試劑盒說(shuō)明圖3


四、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒注意事項 

①為確保試驗重復性,加入試劑二后需劇烈震蕩,振蕩幅度、時(shí)間、反復次數以及等待分層時(shí)間 均應保持一致,檢測體系中 65℃水浴后冷卻時(shí)間應保持一致; 

②若測定吸光值超出標準吸光值線(xiàn)性范圍:高于最高值將樣品使用試劑一適當稀釋后再進(jìn)行測定, 低于最低值建議適當增加樣本量后再進(jìn)行測定,計算時(shí)相應修改;

③檢測過(guò)程中使用具有易揮發(fā)性物質(zhì),建議在通風(fēng)櫥中進(jìn)行測定,并做好防護措施; 

④為保證結果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說(shuō)明書(shū)(以實(shí)際收到說(shuō)明書(shū)內容為準), 確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本進(jìn)行預測定, 過(guò)程中問(wèn)題請您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。


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