1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測幾個(gè)樣品？

1）48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標準曲線(xiàn)；96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標準曲線(xiàn)

2）以96T試劑盒來(lái)算，定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復孔檢測，最多還能檢測80個(gè)標本；48T的最多30個(gè)樣本。

2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復利用嗎？

96T，一般做復孔的話(huà)，做標準曲線(xiàn)需要16個(gè)孔，剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發(fā)現沒(méi)有現成的試劑盒用，現在就有2種備選方案，一種是買(mǎi)抗體對自己包被（查了R&D等大公司都沒(méi)有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會(huì )不會(huì )比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢？

如果你覺(jué)得技術(shù)不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買(mǎi)抗體對自己包被，這個(gè)就是麻煩點(diǎn)，自己包被用著(zhù)放心，舒心；

另外國內還是有一些資質(zhì)不錯的公司，如北京達科為，上海巧伊，依科賽，深圳欣博盛等等

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個(gè)樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時(shí)要大于200ul每支），直接實(shí)驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。

不過(guò)ELISA最好少量樣品進(jìn)行預實(shí)驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測量不準，或者濃度過(guò)低，小于試劑盒最低可測濃度。

5、Elisa試劑盒該買(mǎi)哪家公司的呢？

提出這個(gè)問(wèn)題的朋友其實(shí)該打，目前國際上各個(gè)品牌的試劑盒生廠(chǎng)商，都會(huì )有其偏重點(diǎn)，像R&D在細胞因子方面的試劑盒就非常牛逼，而其他牌子也一樣的。

Bender：粘附分子方面的試劑盒；

Cayman：花生四烯酸類(lèi)產(chǎn)品的試劑盒；

Merck(Linco)：內分泌研究方面的試劑盒；

Tips：

1、買(mǎi)Elisa試劑盒時(shí)，盡量先查文獻，通過(guò)文獻找品牌，再找供應商，找供應商就找正規代理商，千萬(wàn)不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。

2、ELISA中，復孔就是同一個(gè)樣品加到至少兩個(gè)孔中（一般3個(gè)或4個(gè)），最后取其平均值作為樣品的讀數，這樣測得的結果才有說(shuō)服力！

做復孔是為了較好的較少組內差異，如果血清不足不做復孔也可以。